成都生物所獲得熱穩(wěn)定大幅度提高的羰基還原酶突變體

　　中國科學(xué)院成都生物研究所吳中柳課題組研究人員從實(shí)驗(yàn)室已有菌株Chryseobacterium sp. CA49中篩選得到酶學(xué)性能優(yōu)良的羰基還原酶ChKRED20，為進(jìn)一步提高該酶的熱穩(wěn)定性，從而提高時空效率和工藝靈活性。課題組運(yùn)用定向進(jìn)化手段實(shí)施分子改造，通過對隨機(jī)突變文庫的篩選和有益位點(diǎn)整合，獲得了熱穩(wěn)定性大幅度提高的突變體M135，其反應(yīng)活性未受影響。最適反應(yīng)溫度升高至65°C，而且在65°C非常穩(wěn)定，連續(xù)處理15天后殘余活性大于95%，而野生型在此條件下的熱失活半衰期僅為12分鐘。突變體在65°C條件下轉(zhuǎn)化底物的時空產(chǎn)率比母本有很大程度的提高,3g/L的粗酶液可在1h內(nèi)完全轉(zhuǎn)化300g/L的COBE底物（Liptor邊鏈，阿托伐他汀等醫(yī)藥中間體），ee值＞99%，具有良好的工業(yè)應(yīng)用前景。 

　　該研究成果發(fā)表在Appl Microbiol Biotechnol, 2015. DOI 10.1007/s00253-015-7200-2。 

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　　突變體M135